Элайза Патриция Душку родилась 30 декабря 1980 года в городе Уотертаун, штат Массачусеттс, США. Там же она окончила местную школу. Несмотря на то, что она воспитывалась в религиозной семье, Элиза не очень верит в «высшие силы». Ее мать - профессор университета Suffolk University, считала, что дети должны увидеть мир. «Когда мне было 14, и моему брату - 18, она дала нам 1 тысячу долларов на каждого и два билета на самолет до Пекина и приказала не возвращаться до тех пор, пока мы не увидим 8 городов» - рассказывает Элайза.

Свою актерскую деятельность Элайза начала, делая постановки для глухих детей в театре Уотертауна. Свою первую роль в кино она получила в фильме «Та ночь», когда ей было 10 лет. Также она появилась в фильме «Правдивая ложь», однако после этого решила сделать перерыв из-за своей учебы в школе.

После окончания средней школы Элайза вернулась на экраны в роли Фэйт в сериале «Баффи - истребительница вампиров». Изначально было запланировано всего пять эпизодов, в которых Душку появится в этой роли, но её персонаж стал настолько популярным, что она осталась в сериале до конца третьего сезона и потом ещё появилась в двух частях четвёртого сезона. И вернулась в конце 7 сезона для съёмок финала сериала.

В 2000 году Душку появилась в фильме «Добейся успеха» вместе с Кирстен Данст. Фильм имел огромный успех и хорошие продажи на DVD, после последовало ещё 4 фильма-продолжения, выпущенных специально для DVD, но Элайза там уже не снималась. В 2001 году Кевин Смит пригласил Душку сняться в его комедии «Джей и Молчаливый Боб наносят ответный удар», в этом фильме она снялась с Беном Аффлеком и другими известными актерами.

В 2003 году Элайза снялась в фильме «Поворот не туда», где у неё уже была настоящая звездная роль. Начиная с 2003 года она начала сниматься в главной роли в сериале «Вернуть из мертвых», где она играла студентку Тру Дэвис, которую взяли на работу в морг, где она открывает в себе способность возвращаться назад во времени по зову умершего, и пытается помочь ему избежать смерти.

В 2008 году Элайза сыграла детектива Мэган Пейдж в триллере с элементами мистики «Алфавитный убийца» по мотивам реальных событий о серийном убийце в небольших городках штата Нью-Йорк. В целом картина и роль Душку получили негативные отзывы критиков. В 2009 году Элайза вновь вернулась на телевидение в новый проект Джосса Уэдона «Кукольный дом». Сериал показывали по телеканалу «FOX», он продержался лишь два сезона. Элайза Душку снималась в клипе панк-группы «Simple Plan» «I’m Just a Kid».

Упорно работая и изматывая себя, к своему 18-летию девушке удалось стать полностью независимой от своих родителей. Она хорошо поет, изучает различные танцы и занимается йогой. Ее музыкальные вкусы разнообразны и включают в себя как Лорин Хилл, так и «Металлику».