Эми Мередит Полер родилась 16 сентября 1971 года в городе Ньютон, штат Массачусетс, США. Ее родители: Эйлин Фрэнсис Милмор и Уильям Гринстед Полер, были учителями. У Эми ирландские корни, ее семья принадлежит к католической церкви. Она приходится дальней родственницей писателю Стивену Кингу и сенатору Скотту Брауну.
Как утверждают многие зрители, которые видели в шоу, где Полер играет комические скетчи - «она прирожденная актриса». Эми Полер впервые начала выступать в качестве актрисы, учась в Бостонском колледже. Первое шоу, в котором блеснуло юное дарование, называлось «Авоська моей мамы». В нем рассказывалось о трудной студенческой жизни и проблемах, которые возникают в процессе обучения.
В 1996 году Эми начала работать в группе «Upright Citizen's Brigade». «Upright Citizen's Brigade» - это самостоятельный театр, где играют скетчи. Актеры этого театра очень часто обращаются к зрительному залу, разговаривают с публикой, спрашивают их совета, задавая вопросы, чтобы сильнее вовлечь зрителя в происходящую дискуссию. Позже она переехала в город Нью-Йорк, что неудивительно, учитывая, что она очень хотела сниматься кино.
Актриса за год успевает сняться в нескольких картинах. На сегодняшний день в ее послужном списке около двадцати теле- и кинофильмов. Сама актриса признается, что больше всего на свете ей нравится сниматься в комедиях. Это тот самый жанр, в котором она может полностью раскрыться, поделиться с людьми своей жизненной силой и оптимизмом.
Эми Полер рассказывает, что билеты на спектакли с ее участием стоят около семи долларов. Такие деньги может себе позволить каждый студент, поэтому их в зрительном зале очень много. Для Эми важно, чтобы было настроение, тогда шутки, даже незапланированные, льются из нее рекой. Она испытывает на сцене больше удовольствия, чем перед камерой на съемочной площадке.
Будучи беременной, Эми Полер сыграла суррогатную мать в фильме «Baby Mama». Она снималась в таких фильмах как «Ой, мамочки», «Человек года», «Дрянные девчонки», «Черная зависть». Кроме того, Эми постоянно озвучивает мультфильмы. Она участвовала в работе над такими хитами, как «Элвин и бурундуки 2» и «Элвин и бурундуки 3», «Красная Шапка против зла», «Монстры против пришельцев», «Шрек Третий», а также стала соавтором анимационного сериала «Могучая Би!».
С 2001 по 2008 год была постоянным участником шоу «Субботним вечером в прямом эфире». В 2011 году журнал «TIME« включил Эми Полер в список ста самых влиятельных людей мира.
Летом 2003 года Эми Полер вышла замуж за актера Уилла Арнетта, с которым снималась вместе в ситкоме телеканала Fox «Замедленное развитие». В 2007 году супруги вместе снялись в комедии «Лезвия славы: Звездуны на льду». В октябре 2008 года Эми Полер родила сына Арчибальда Уильяма Эмерсона Арнетта. В августе 2010 года на свет появился второй сын Абель Джеймс Арнетт. В 2014 году Уилл подал на развод.