Лионель Родриго де ла Серна Шевалье родился 18 апреля 1976 года в городе Буэнос-Айресес, Аргентина. С детства интересовался театром, и со временем из этого интереса возникло твердое намерение стать актером.
Родриго де ла Серна дебютировал на экране в середине 1990-х годов, а его первой заметной работой стала роль в сериале 1997 года «Полтора апельсина». Первую крупную роль на телевидении Де ла Серна получил несколькими годами позже, войдя в постоянный актерский состав сериала «Чемпионы».
Международную известность актеру принесло участие в отмеченной многочисленными наградами биографической картине Уолтера Саллеса «Че Гевара: Дневники мотоциклиста». За роль Альберто Гранадо, исполненную в этом фильме, Родриго стал лауреатом премий «Серебряный кондор» Аргентинской ассоциации кинокритиков, премии журнала «Clarin», премий «Независимый дух», «ACE Award» и «Imagen Awards», а также номинантом премии Британской киноакадемии - «BAFTA» и премии «OFTA Film Award».
Зрители Аргентины и других латиноамериканских стран знают Родриго также по сериалу «Братья детективы», где он сыграл вместе со своим тезкой - юным актером Родриго Ноя. Другими наиболее значительными работами Родриго де ла Серна стали роли в сериалах «Против веревок», «Трофеи», «Сквоттеры», «Черное солнце», «Потерянное время», «Ведущий игрок» и фильмах «История одного побега», «Революция», «Слепой скалистый петушок».
Де ла Серна известен не только как артист, но и как музыкант: вместе с Бласом Альберти и Хуаном Пабло Диасом Эрмело он является участником музыкального трио «El Yotivenco», исполняющего танго.
С 1999 по 2010 годы актера связывали романтические отношения с Эрикой Ривас, вместе с которой он снимался в сериале «Чемпионы». В 2000 году у пары родилась дочь Миранда. С 2012 года Родриго де ла Серна встречается с актрисой Пилар Гамбоа, с которой познакомился на съемках сериала «Принудительные времена».