Кейт МакКиннон родилась 6 января 1984 года в городе Си Клифф, штат Нью-Йорк, США. Окончила Колумбийский университет. В начале своей карьеры, с 2006 года по 2010 год, она была регулярным членом актерского состава скетч-шоу «Big Gay Sketch Show », а также выступала в других комедийных программах.
В 2012 году ону присоединилась к «Saturday Night Live» в качестве исполнительницы женских ролей. Кейт вошла в историю этого шоу, став первой открытой лесбиянкой в регулярном актерском составе. В 2014 году выступления в этой программе принесли ей номинацию на премию «Эмми» за лучшую женскую роль второго плана в комедийном телесериале, а в 2016 и 2017 годах она ее выиграла.
Как актриса, Кейт прославилась после съемок в фильмах «Охотники за приведениями», «Третий лишний 2», «Партнеры по жизни», «Сестры», «Зачинщики», «Новогодний корпоратив», «Очень плохие девочки», «Незаменимый ты», «Шпион, который меня кинул», не говоря уже о нескольких десятках телевизионных сериалов. К тому же, она озвучила героев мультфильмов Фердинанд», «В поисках Дори» и «Балерина».